剛剛過去的金秋十月里，諾貝爾生理學或醫學獎如期而至，mRNA 疫苗開發者 Katalin Kariko 博士和 Drew Weissman 博士獲此殊榮。基于 mRNA 技術的新冠疫苗改變了全球對抗新冠的格局，他們的獲獎是眾望所歸。在 mRNA 的眾多技術中，脂質納米顆粒（LNP）技術顯得至關重要，它是 mRNA 進入人體內的必須運送載體。

脂質納米顆粒（LNP）介紹

脂質納米顆粒的研究可以追溯到上世紀 80 年代，科學們通過不斷的探索和實驗，找到了各種適合的脂質。利用微流體技術將脂質和核酸進行混合，從而成功制備出納米脂質顆粒。根據組成脂質納米顆粒的脂質特性（圖 1），我們選擇使用 Infinity II LC 液相色譜系統對 LNP 進行分析和表征。

圖 1. 脂質納米顆粒的示意圖

安捷倫脂質納米顆粒分析解決方案

反相高效液相色譜

蒸發光散色檢測器（HPLC-ELSD）

以上市的一款 RNAi 藥物 Onpattro 為例，采用 HPLC-ELSD 分析方法，1290 Infinity II ELSD 檢測器針對無紫外吸收的四種脂質具有較高的靈敏度和較好的穩定性，滿足實際樣品的分析需求（圖 2）。

圖 2. LNP 中四種脂質的色譜圖

隨著 LNP 技術的不斷更新，可電離脂質的種類變得越來越豐富，新冠 mRNA 疫苗的 LNP 由可電離陽離子脂質（SM-102）、聚乙二醇聚合物、膽固醇和 DSPC 組成，基于以上方法，也可以將這四種脂質進行很好的分離和準確定量（圖 3）。

圖 3. 新冠 mRNA-LNP 疫苗中四種脂質的色譜圖

超高效液相色譜分析方法

蒸發光散色檢測器（UHPLC-ELSD）

基于 1290 Infinity II UHPLC 和 1290 Infinity II ELSD 的超高效液相色譜系統，可以實現超快速高效率的 LNP 分析，總的分析時間在 5 分鐘以內 [2]（圖 4），極大提升分析效率。

圖 4. UHPLC-ELSD 分析 LNP 色譜圖（七針疊加圖）

超高效液相色譜

蒸發光散色檢測器/質譜（UHPLC-ELSD/MS）

在 UHPLC-ELSD 的基礎上引入了單桿質譜 MSD，與 ELSD 并聯于 UHPLC 系統中（圖 5），作為脂質降解物定性分析的工具，可以清晰看到脂質及其降解產物質譜圖（圖 6），從而可以對降解雜質進行深入研究。

圖 5. UHPLC-ELSD/MS 儀器連接示意圖

圖 6. 脂質分析的質譜圖

1290 Infinity II ELSD 蒸發光散色檢測器

安捷倫新的 1290 Infinity II ELSD 檢測器，配置了特殊光電倍增管和性能顯眾的激光器件，靈敏度比常規 ELSD 高出 5-10 倍，更適合痕量分析（圖 7）。特別的霧化噴頭設計，具有出色的穩定性，為使用者提供可靠、準確的分析結果。

結 語

Infinity II LC 儀器搭配 1290 Infinity ELSD 檢測器（或單桿質譜）為脂質的研究帶來了嶄新的分析體驗，隨著脂質納米顆粒 LNP 研究的深入，安捷倫的液相色譜技術將助力 LNP 應用于更廣闊的領域。